本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。3 ]( S' t" A0 B o# N. J; |" T: `
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
6 f9 c5 O7 `0 a( p" |( X; T; h& X3 | 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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目录
5 z% B% ?7 |9 Z第1篇 PCR导论
: @9 H1 p6 `7 L: Q0 W( ~1 建立一个PCR实验室" t n+ N, x; Q9 R' @, ?6 Y
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
* O, X$ V2 o5 T, M$ K3 高保真PCR酶' ~0 @9 L3 T: o2 O2 u4 k, [1 G
4 PCR的最优化和常见问题解析- }0 O" c, C0 S9 B
5 富含GC片段的PCR扩增0 v! x- \: q) P
6 精确扩增大片段的技巧
5 B* ^# @8 l0 K# J' I5 @7 PCR引物设计+ Y6 E9 r+ b3 D* e$ k: Z
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序+ H9 l! t5 n. d+ s2 O \' V5 r8 h
第2篇 样品的制备
7 P& b& _8 {2 d+ h7 h" @, W9 DNA的纯化
, s) v' i+ g; N0 M; j, p10 RNA的纯化
) |- g+ k* a7 b3 Z6 \) U- O11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达; p, o- _% H" j
12 克服PCR受抑制的策略! U3 ?) R9 A* ~* O% w
第3篇 RT-PCR方法7 y0 Y; F7 ?' n5 s
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用9 o! J, O& G. v2 M$ f
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler8 e8 \" J4 {7 H4 ]0 E
15 定量PCR的新技术
; Z. G' g$ n J4 S1 w16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增/ N0 M' }7 I( M+ s: s% d
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
$ ?1 A) N9 N T17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法% C+ {" @' E" h& ]5 w) x" d8 \
18 单链构象多态性分析8 I! @' ~' e0 i4 j! K, N) f
19 逆转录酶原位PCR# z- ^1 j- l! L
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法' F4 c$ V6 l* }; ?, J" c7 J/ n; _ {
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
0 [( F# g0 m; T$ x" T, b21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
% ]5 m% j0 A; ?9 B; C- _. t0 |' |# n22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
8 u- D) {# I# Z1 B: [0 {23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
3 r3 w- Z3 }, o% F第6篇 用PCR进行克隆
8 W$ w! P T: m6 g24 以PCR为基础的文库筛选方法
7 s. g/ h4 S! K4 [/ R4 r* r( s25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进) `$ x; P1 ~% I9 k1 @ m2 q
26 用PCR合成和分析DNA文库0 R& N, W/ w2 y
第7篇 PCR产物的克隆
, G- n5 S' O' }; ]$ U27 克隆PCR产物的策略
5 } ?6 K) i4 Z9 r' H) ?28 PCR产物双向和定向克隆) b& o7 U+ A! `4 R0 g+ i- E0 }
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建5 x# k9 H2 T% T. N
第8篇 利用PCR进行诱变
1 b* p3 S) `& i# {( S30 诱变PCR4 E, Q3 \1 ~6 t: A- j2 N
31 快速PCR定点突变. N0 j/ {2 U p) W+ T# T$ X" I
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
% n& L) o, Q$ U$ Y+ _33 流线型基因装配PCR. R: ~. X' e( C
附录1 专利% s: A0 @8 S. L/ K/ a* I" E
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
& k, m. p- D7 b8 g附录3 注意事项
5 a: A6 w/ I U: M4 U$ F附录4 供应商* C- R7 ], c( n3 z. n3 }
索引6 F- U; p6 B; S/ G" ^
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