本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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" @7 ~$ Z c& J' g聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。 {2 d( r+ ^2 E9 M( }. I7 P7 ~' R
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
2 z, H K e7 n4 ? P 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。8 Q. X: T- L9 H
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目录5 `# M% X! ~0 c4 V
第1篇 PCR导论
& e, s- Y3 u0 {0 a+ t, _) {1 建立一个PCR实验室
* s. H) \/ ^! T( m2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略: |6 T" j8 r, V2 G0 V7 X* |; A! F
3 高保真PCR酶( o. i1 R5 c0 g) O6 f
4 PCR的最优化和常见问题解析, P8 C1 y9 }, g# J
5 富含GC片段的PCR扩增
: N$ {9 U& w N4 F2 \% l0 N6 精确扩增大片段的技巧' s/ _- L9 [8 D% m
7 PCR引物设计
" |# ]% q( G7 Z2 U- T3 P A: B6 c* n8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
5 C5 z5 ^+ {8 d3 l2 C8 }5 d第2篇 样品的制备
+ A5 N0 v! g% n9 DNA的纯化; T1 O5 \9 b4 O+ j1 ~: R) |
10 RNA的纯化' M5 A- ^7 F1 P' }% z z
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
9 y K* {; [" O# e- t$ U y12 克服PCR受抑制的策略3 w2 I7 L6 Y! O; G4 l
第3篇 RT-PCR方法, T1 j- r" |( c4 U( T% W! S
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用1 f: a6 z5 o9 u# q o) z) S4 Q
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
( S. a% F0 @1 ]4 E! v. J15 定量PCR的新技术( K% ^! _* }7 g# B; w
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
" h4 u6 j& O' m第4篇 PCR产物的检测:专门应用
$ u7 M; c% h' m$ p0 \8 i5 p/ Y17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法" }7 n0 g; g/ ?; M2 P
18 单链构象多态性分析
$ L- A) A+ u% v K% D19 逆转录酶原位PCR8 I: a: J( f: T4 N9 b" K7 w
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
* k' H/ R- x# Z/ T, x7 W, v+ Y第5篇 用PCR分析基因的差异表达
. @. ^) _+ S8 V f3 a: \21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用' v' j* S. T- P! d
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
/ B; e) B8 E. Z9 C/ s; w7 N23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术: t# U( P9 p% f: G$ i
第6篇 用PCR进行克隆
V, F* z) \8 Z+ w( e- C( Z( [+ m24 以PCR为基础的文库筛选方法
$ B4 ]: t" l& ~25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
+ q% N* P3 ~; a U2 c5 U26 用PCR合成和分析DNA文库
7 G' o4 e" y8 x4 f( b' w第7篇 PCR产物的克隆
) E% V4 q. M, I- W27 克隆PCR产物的策略) M+ N& ?! J% |+ n! B! e: U0 }) a' j8 ]
28 PCR产物双向和定向克隆# a. v0 s0 Z4 P
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
. N1 P9 r1 U' s- p T第8篇 利用PCR进行诱变9 n8 ~3 F1 i; }
30 诱变PCR8 K4 X$ H, S" T5 r+ u7 `
31 快速PCR定点突变/ a1 c$ h* x% s) x6 I
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
6 t" R$ y# v) U2 L0 U: T33 流线型基因装配PCR
' v s. U- x) I. L) }$ X) S! I6 J2 v附录1 专利
1 j( P- e, _0 J1 i附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
$ V" B+ H7 s7 j- D, L附录3 注意事项
1 t3 A# U4 |) G" j3 i7 |附录4 供应商
5 s2 t- \9 f2 P% }: D8 b9 G索引
$ L# T4 _0 L$ w$ J w# T- m) A# z! X5 A0 }& n
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