本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky; m) l2 @, o j$ a3 b. o
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。' j0 t. i' W: e7 p7 I- G+ Z1 R5 t
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
( E2 O% t, d6 {5 ^8 Z 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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目录
0 q" _0 e$ n/ ~: Y第1篇 PCR导论1 d4 f3 d, b* _7 D. G
1 建立一个PCR实验室9 ?; g( F& J% R5 D& k) D6 k
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略' E' M) b& T* w4 S! g
3 高保真PCR酶
6 f# a, m" a) d; ?6 o4 PCR的最优化和常见问题解析: d: @' b# t7 G. I# {
5 富含GC片段的PCR扩增
; u0 Q) {/ x# H% D" x7 R3 l6 精确扩增大片段的技巧% B) e; {. q: H
7 PCR引物设计
# S8 F# c3 W; ]" }5 T) Z8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
# U( T5 ?2 B9 M% u3 O# h$ L第2篇 样品的制备
3 m8 a3 r1 I( w+ C$ \( e, p+ Q) N9 DNA的纯化
/ ?& q* F. I$ w' K+ U1 l10 RNA的纯化+ I! I9 E. I4 |0 u: F
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
+ r) O8 T" _/ S7 U12 克服PCR受抑制的策略) L. l7 c6 Y5 s* R
第3篇 RT-PCR方法
2 Y6 Y! O$ i7 t1 b2 Q# |; D13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
% S8 \! b) c; l/ B+ E3 S7 Q/ k14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
* [6 Q; A- k5 \3 ~* E5 B15 定量PCR的新技术
% T1 b' f! R, Z. V4 w0 l* b4 B# x16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
0 f+ R: e/ B( s) S0 { n* C4 q第4篇 PCR产物的检测:专门应用' A1 e7 ^& [' n7 i3 [
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法; j4 d a2 W5 S+ c" P
18 单链构象多态性分析
) I- ^/ p: p+ }. l- l19 逆转录酶原位PCR
7 @" D; J# _$ ~( V6 l: |0 R, N20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
9 X6 [/ C. P8 M) l$ P" h第5篇 用PCR分析基因的差异表达
( v @) k- T( L5 S# b21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用. R. n- T0 e" O) _( W5 P$ a
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因# e5 p. g$ q2 T
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
0 |& W% n( q0 C# O, |第6篇 用PCR进行克隆
6 ]* E( u7 `: n( u# F5 w24 以PCR为基础的文库筛选方法
5 H% l2 F4 p* d' u' A6 e4 l25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
% O" P- R+ C2 a# z! H4 J26 用PCR合成和分析DNA文库
X7 T- |+ J: n7 z v6 r5 F第7篇 PCR产物的克隆
; ~' b5 P4 M! t, P' i& {0 F; @" @. A27 克隆PCR产物的策略. Z$ Q# n% w! e& t0 j* L) |
28 PCR产物双向和定向克隆3 S. Y3 ? ?' ^8 ?; I
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
7 a5 u( E) b1 z# G: X' \0 x第8篇 利用PCR进行诱变, Q& Q2 N" Q( K* I( j
30 诱变PCR# F6 U8 v9 E5 x$ v- ` X
31 快速PCR定点突变6 J" }" B! R( i4 ~% |$ ^: `$ J
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
2 q# z4 z* \( O0 X33 流线型基因装配PCR
$ [5 E6 K6 r& U$ p附录1 专利, [& M: |1 \2 c6 G
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰! U8 d( N/ t `
附录3 注意事项( ^! K% }0 p5 l* [$ `* |
附录4 供应商( v* h9 V' P5 X& D" }- I$ v
索引' j* o0 S/ j1 E' Q R, i
' R% h: U" K: `+ e- d$ ^' ]. \
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