本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky, M4 `. ?- ^$ f7 J& _& T
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。; ] [9 B; v+ a
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
3 ~- I# T- `" N& I$ V( [' t 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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: O9 D8 P! a3 g: M目录5 m5 I4 A8 R2 R" e
第1篇 PCR导论
6 @1 G# v& l, |9 z- M# Y& T1 建立一个PCR实验室
8 n) b, T e3 P+ } S9 K F' W2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
; p" _- Q. ? S$ T( {/ K* j! d3 高保真PCR酶# i6 A# L: h2 E; m0 s0 f
4 PCR的最优化和常见问题解析
5 e+ |. E6 X) p5 富含GC片段的PCR扩增+ I. \0 U9 ^0 P; X
6 精确扩增大片段的技巧7 t1 E" e6 w/ a' F
7 PCR引物设计
! k" y7 D" O: ^. N! X8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
9 }* @2 Q+ [. B. ]" s第2篇 样品的制备
5 j' S7 P( p( ~' E5 R$ W. B" [2 v+ b' ^9 DNA的纯化 _, B) e& v( P
10 RNA的纯化# q+ M3 X/ c6 O! O4 `
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
0 H u* s7 c: S8 A5 D, [ k/ K12 克服PCR受抑制的策略
% z1 r8 E. U& Z7 m/ o" W& N% D第3篇 RT-PCR方法
4 n- t; a* X6 C, S13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用8 U( y: b* R# l$ m4 W/ \
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler$ G& ~9 Q5 T; U6 T# S8 D2 q
15 定量PCR的新技术6 _9 M3 b7 F6 Z! v& R
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增8 I2 Z! t O; ~' A3 s9 Z
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
" c* @2 Z N# ?17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
& I+ ]- i( M4 t: e+ _+ x% i [3 o18 单链构象多态性分析
$ w- `' s, o1 N, u7 J: W" A* V6 ?- {19 逆转录酶原位PCR! _0 x0 s! u/ {2 z! J. m4 z- u$ @
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
1 @* X; j. e% m- {3 S( z! O/ |第5篇 用PCR分析基因的差异表达
) N/ O& {- G0 K# ~2 d- l; q21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用( T0 i# I1 [1 F" O* O( f
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因+ t Q5 J* v: U
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术 Y! [+ C2 x! |. B
第6篇 用PCR进行克隆
- C: }, H- q* F" L7 f% I24 以PCR为基础的文库筛选方法) A) C& Y, V- ~. I ^0 o' z. T7 i; s- s
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
: d2 B& ]3 y5 z3 t% l/ V26 用PCR合成和分析DNA文库
! y( V/ G1 b( |. ]第7篇 PCR产物的克隆
* A* N5 ~) o$ i7 F6 [& ^. {27 克隆PCR产物的策略' r/ Y% g: \" X7 g5 r
28 PCR产物双向和定向克隆
# h0 I; b8 Z- c" y+ H* M& _9 F29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
+ ?" K5 h8 \) e第8篇 利用PCR进行诱变3 _( i: S3 _& V: i6 w3 Z
30 诱变PCR Z; F, K" g" v4 \5 F9 d
31 快速PCR定点突变
# B* D% b1 z' q/ C2 g) ?* i32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
% v# z6 Q* k4 q, g5 b33 流线型基因装配PCR
0 g- A6 R$ W+ w6 _附录1 专利5 j" n2 |7 Z, A3 U- e& C P+ e
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
5 \# s2 @- v, N. M附录3 注意事项$ W+ i6 u, i# r" j
附录4 供应商
* \( h$ h4 q! l) Q9 A/ {! f索引8 q* N* t% U5 l
! n9 K' _- t6 q# ]4 [' R8 z8 D. l5 {- I" y3 P7 {, a% F. Y
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