本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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& M! D6 t! l/ K! ^聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。7 E& u! ?( L# K# J/ z' M3 X \
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
2 P+ b2 D- n" l4 B* J 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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- l2 ?0 ?* X/ N( o& t目录
5 w0 P f4 b* B% g9 i0 Q9 _: J第1篇 PCR导论5 P8 s4 s" V2 b4 J8 [) J
1 建立一个PCR实验室) q9 E' V4 t) U; B' P7 M& S6 o
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略: F) A2 }& m, v4 e% `: u
3 高保真PCR酶2 s, x% L. N" O7 J0 V2 Q
4 PCR的最优化和常见问题解析
( K% U% ^0 Y+ r$ e' T5 富含GC片段的PCR扩增
7 p! Q7 ]: l# A0 ?" z$ X: I6 精确扩增大片段的技巧
' _" ?; E+ z4 d* r+ m; c7 PCR引物设计' p" a# \( ^5 r/ k
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
2 z! ^4 o+ W4 i6 O5 h7 J0 S第2篇 样品的制备: X4 l: w% |7 j& U% E& ?
9 DNA的纯化
' L4 S- ~! \, q Q6 Y4 {4 j8 T10 RNA的纯化. X% T8 E. q5 \! g( ~
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达2 l' X- z* H3 B8 ^! \- p
12 克服PCR受抑制的策略 u, x0 G6 ~( n
第3篇 RT-PCR方法8 Q, J$ S) O+ ]
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
! B' U1 y7 t1 Q1 F14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler5 q) d7 m, L# g
15 定量PCR的新技术
- s! Q6 f+ y7 Z* c8 d16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增4 J7 A- J( G7 q" t' F2 p% c+ a3 U
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
! Z4 W+ U' g1 z' s3 {* ?6 Y) e17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
" \" B" }' Y6 l18 单链构象多态性分析
( M: U& W; K/ V+ Z: ^* \$ {19 逆转录酶原位PCR+ U$ A2 k% i: b+ G2 s. }; c& U
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法4 u9 r+ b" T' I R, T" c
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
, G3 M. `) I: |: I5 v21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用( i! ^5 V; z- T" {1 }
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
& z7 W) n; B9 M% m K23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
- V6 z* A8 I- r |& ?第6篇 用PCR进行克隆6 Z6 L( a4 n9 e3 x8 Y7 w
24 以PCR为基础的文库筛选方法( Z) P' m( q4 v+ K/ o
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进2 ?- a( k0 j V2 t
26 用PCR合成和分析DNA文库
6 H: V! X1 q6 @9 {: ~- F7 ^3 r第7篇 PCR产物的克隆
' f- \0 L' z# K. I- `! C27 克隆PCR产物的策略/ q* Y( O0 t' B Q
28 PCR产物双向和定向克隆9 W8 Y% G+ @. P- E2 {$ K5 c, k
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建+ k$ b3 B5 y0 f9 N
第8篇 利用PCR进行诱变! @& Y4 h. f; l; y- B! `( j
30 诱变PCR7 Z4 a, h# H, T$ `: R3 R7 t
31 快速PCR定点突变
3 N0 r4 C7 }+ e; t5 F32 利用PCR来突变和合成新的重组基因; L8 B1 @& x) X* E, G
33 流线型基因装配PCR
+ Y5 j. j1 U& ]$ x* }附录1 专利
/ \& ^7 G {- B& ~附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
& i7 _5 ]2 J4 b9 ?# q" F- g% j+ d- `% x附录3 注意事项: V2 g* z* F7 u. ?4 ], n$ L1 {
附录4 供应商
6 M: Y h$ ?5 O索引6 U7 v: }4 ~% x; B, Y; k
L$ P3 W* }; G0 _. H2 P% q3 v+ T& ~* o N2 d3 G- U* y, K
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