本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky( s) @ y! E8 s( n) E
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
: v& w+ `6 B7 y( Q& W8 e% `# ~) o 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。- A! F6 q( i! e8 p
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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/ u* ]! V2 |6 j( c5 u8 w目录
$ v5 Z6 t, X: P7 s6 ^0 X第1篇 PCR导论
2 O* T) `. P5 `. D2 s9 U5 ?1 建立一个PCR实验室
7 p( }' Z9 b1 p2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
3 D! {% l$ M7 c) m9 c4 V$ t- W3 高保真PCR酶
. \( T. f1 b! S, N4 PCR的最优化和常见问题解析
" V( H5 h6 R" E! E( w# t5 富含GC片段的PCR扩增2 S, P, n2 ~8 u
6 精确扩增大片段的技巧3 n7 Y2 V! n- @! \8 e2 ?' K
7 PCR引物设计7 G D$ y8 b+ H2 R; C( f
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
" o9 _3 h. d, n3 m7 d第2篇 样品的制备1 l8 I. Z, Q: ~7 c
9 DNA的纯化
# ~ ?% H9 G1 ~4 U4 u10 RNA的纯化
# _" Z, ]: r( I2 }0 ]11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达: i" u1 C* n- t1 W8 ?# o6 ]
12 克服PCR受抑制的策略
$ l6 W& Z5 f9 W1 ?! P第3篇 RT-PCR方法
& i# Y" o) V$ ]2 V13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
+ b! `' ~: V6 q1 l' u14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
( [ W, l, T$ c" L% x15 定量PCR的新技术
' r+ n8 _$ V/ m: x) b. }4 v! T4 }: Q16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增# U0 X/ P( a, Y3 B
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
' q" r3 W: i4 q17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
2 {* L( t: d$ w" |/ g6 \ a& a18 单链构象多态性分析' L1 y" i4 ^$ g3 u
19 逆转录酶原位PCR
: A) {' @! r4 Y3 k& i+ |9 |20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
; ~3 x/ O# c- m+ y3 |( v第5篇 用PCR分析基因的差异表达; f, f4 x9 G- V5 n+ K. n
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
* i; ^8 u: E6 w22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因3 Y9 w0 t2 d) H4 X1 P7 G* q
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术+ u- ~! K" X2 @* U0 ~2 C
第6篇 用PCR进行克隆: B3 m$ U' d9 u1 S/ U6 w8 P
24 以PCR为基础的文库筛选方法
2 C+ m( L7 f! p" _1 N* Z25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
1 b" P. W8 T; ~+ l# b6 y. l26 用PCR合成和分析DNA文库
9 I9 v0 z4 a) ^" z: x第7篇 PCR产物的克隆 U; q5 }; W8 H! y5 f. T5 f
27 克隆PCR产物的策略$ |: a2 a& I ^ C- |3 k
28 PCR产物双向和定向克隆
6 ^4 T$ O7 y+ U$ h6 S6 b29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
# G7 f0 Q0 \' \& v2 }8 x第8篇 利用PCR进行诱变
6 o" _& A& u+ h; A* F4 i30 诱变PCR+ ?$ \2 S# c1 V" J* t: S! _
31 快速PCR定点突变
+ N0 m6 p# l, H32 利用PCR来突变和合成新的重组基因 t8 \* L: N8 G& {
33 流线型基因装配PCR
0 l/ A- s2 s+ w: o$ s/ ?& G9 A8 @附录1 专利
; @. ~/ Q, t% h8 ?2 t附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰) ~2 w% O& w4 s$ E" L, g' s
附录3 注意事项3 }/ C7 E: m; x# q
附录4 供应商
( K+ c4 }) a: ]- v, v) v索引
: P. u& ]9 r+ L0 d, a) G/ D: |. i( B
0 A; {7 H, S U- k0 _" u0 r下载地址：* R2 J- G1 U/ N7 Q. }4 C
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