本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky" k2 e# g0 X3 A: M; {+ t0 S
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
7 [+ a# j9 f4 q* Z+ | 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。) B) I* W& Q9 f( |8 [
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。3 N2 W# x& c* \5 [* b% d1 B
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目录9 n- b: \# N- W* o% J+ T
第1篇 PCR导论
+ E. e Y) r+ O2 s- f6 q9 Q- D. P1 建立一个PCR实验室$ w6 w& J5 d v
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略: @ A# X' Y* |' M, k
3 高保真PCR酶
- D( n3 y% y o9 K9 `9 y" y' f; H4 PCR的最优化和常见问题解析/ U3 `- M" f7 }
5 富含GC片段的PCR扩增
3 W" K- M6 k+ U5 M6 精确扩增大片段的技巧
1 K* p6 h/ X% A: r. H3 S: {7 PCR引物设计' M' S2 x+ C* J
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序+ i' p4 q( }" ^
第2篇 样品的制备
" r3 |; P8 s. q0 B2 |0 M& S( V2 l- a9 DNA的纯化' }' X! i$ d5 w J
10 RNA的纯化
, c; K. t- |6 g5 ~4 @/ w! r+ ^2 Z8 y11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
) H" n* X7 r! Q3 `1 h4 u12 克服PCR受抑制的策略
y: Q" u, o5 k8 A第3篇 RT-PCR方法" s5 e7 K6 @. y, j. |3 o
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用$ I9 F! e* S0 g4 ]; m1 H2 G3 u
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler; p7 H2 n' p E4 o; [$ I
15 定量PCR的新技术6 I _ u9 E/ d& I$ b9 {( q$ O4 Y5 a
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
3 s. O* K3 e- b- s% J4 ^; n0 D0 Z第4篇 PCR产物的检测:专门应用; Q8 l0 C% Z. K. f& l9 u$ N
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法5 { L- D! u! L
18 单链构象多态性分析 t$ k% b( j& l. Z0 |4 ~. u# q
19 逆转录酶原位PCR
$ i1 W- X! i7 t7 B9 t" J( Q20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法, D0 D. \. @4 A W
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
2 ~$ _# T4 A. s% n% f I21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用/ v. G J; v, w! D
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
* m7 i: R6 m$ n) Z" Z; ~23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
8 |. e; H, v" p: d( F) u第6篇 用PCR进行克隆) q$ ]6 r7 Q8 Z# g
24 以PCR为基础的文库筛选方法7 a5 C( I" E T4 D
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进
7 w0 C9 r- J$ ^5 N. J26 用PCR合成和分析DNA文库3 o& z) U6 g9 g! E
第7篇 PCR产物的克隆
6 j. d4 U* G) c5 ~. R27 克隆PCR产物的策略1 L- Z" K" V/ z7 ~( h
28 PCR产物双向和定向克隆
" v N+ S: O' m ]8 N3 [29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
z; g5 G& Q* n+ D0 V, `2 d第8篇 利用PCR进行诱变
- m- B+ w% E( d) f, m/ m v+ ^30 诱变PCR
; A1 w5 D( y3 D: I0 a& k31 快速PCR定点突变0 Q6 B# y `" Q
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因% V; F M! x2 h+ i0 B* Z
33 流线型基因装配PCR. o8 Y* X2 ~/ [$ P
附录1 专利
9 E+ a* }9 e) J& E* v% r7 k附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
1 g0 ~ i0 ^1 d- m# Z附录3 注意事项
a! ^7 w0 N* ~附录4 供应商
) E6 [2 U+ p4 T9 c5 @. i8 k索引
( q+ I2 n+ n' Y2 E5 l
; e' W k p7 V$ `, M/ T9 v+ e8 D; K+ j
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