本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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4 i8 C- [/ @+ P聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。) }0 W: H, S( V: B+ ]
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。5 R3 F% U( L* e; I; L. X/ c
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。3 R) F: {2 R \1 G D6 G
( L0 k$ ]! ~5 Q0 `" d; `/ ?
目录
. ] F) r: p) M7 [第1篇 PCR导论
9 {$ Q) Q7 j6 v4 W6 a4 W/ @1 建立一个PCR实验室
( @* M7 `/ w6 f b2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
' I- m; K0 s9 H, \3 Q3 高保真PCR酶$ p9 a# e9 W! J9 ]% t
4 PCR的最优化和常见问题解析
+ a3 g5 v. |/ J7 N/ Y5 富含GC片段的PCR扩增
- ?/ Q: K- z9 u5 B- V! g R" U! x6 精确扩增大片段的技巧4 \1 I, C5 `5 b: u( S# z+ m
7 PCR引物设计
, o7 i) `+ h/ X2 L; W8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序) d( _0 e" V, q$ z: |5 ?; l1 E
第2篇 样品的制备
, T# j9 V) m2 e' J7 Q& D9 {- S, |9 DNA的纯化
$ ]8 M4 m; a8 i7 }! z, g7 _10 RNA的纯化
" G8 ^( \6 T9 m' U- a( q6 p2 O- x5 F1 a11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达, n* q- ^ n! e. {7 y( ]- f- I
12 克服PCR受抑制的策略
+ t6 A" c4 K2 `8 H: _' a# G第3篇 RT-PCR方法3 K$ l% [3 }4 L1 {
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用/ C4 ]1 v# N& b( V+ Q% M8 c1 u
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
! @' W+ C, ^( {3 A: b15 定量PCR的新技术
3 U# {9 K/ Q; U7 c% d16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增( u8 T9 c( E7 v: x8 k- q ~6 d* n
第4篇 PCR产物的检测:专门应用5 ]% P' c) }6 ]: y- U. f
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
3 `8 \/ D8 Y& @6 O5 Y18 单链构象多态性分析* P( s) H% E, k; ^" ?) V% @/ |
19 逆转录酶原位PCR
: r E. y2 t9 }2 Z, l20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
( ?1 @; }4 `2 g, `* b6 p3 L5 r' R& a' x第5篇 用PCR分析基因的差异表达8 E4 g& U- S3 J8 M" c. k
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
2 K) l/ D% t f# ^7 D22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
5 v; D# X$ t4 b/ f! O, J23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术: ?, P0 t& i4 q( f+ H
第6篇 用PCR进行克隆. B8 Y+ f7 @$ v5 _+ @
24 以PCR为基础的文库筛选方法
- r2 K* n/ r" J6 t3 m: L% o25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进 w; l `9 ]0 A9 ]% ~' y1 g
26 用PCR合成和分析DNA文库2 x* i7 Z. y- x1 }& Z4 k. K
第7篇 PCR产物的克隆$ h$ }* o" v* M, a
27 克隆PCR产物的策略
- j: N6 u: w% [4 [' D4 b; \28 PCR产物双向和定向克隆; `8 Z) P4 R2 S( u& w* z
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建6 a: D$ `( ^# v2 k
第8篇 利用PCR进行诱变( ~) M! @' ~# S3 t* t2 K+ _6 t
30 诱变PCR+ Q; r( |* r: c/ n$ o: Z
31 快速PCR定点突变/ z$ t6 i4 g, Q
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
1 x5 _) B$ t' |: a33 流线型基因装配PCR4 F4 |* r" t7 [$ }
附录1 专利
$ L) n. y$ i6 x! _9 R0 ?附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰1 k, L: t9 E# o) f" g; e* b7 v x9 W
附录3 注意事项
5 T/ ^) ^- f( K( R6 r- k5 z2 ]附录4 供应商+ u2 ]3 Q9 r5 L3 a/ p
索引' `3 r& k5 Y* S
. A% N. k7 ^! Y/ `( v! A0 b
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