[转移贴]关于猪瘟传代细胞培养过程中的困惑

zhaox

原帖由论坛会员liufengfenyang发表于 2012-5-14 17:56 |

大家好，我是刚开始接触ST细胞，之前听说这种细胞易结团，所以我传的时候格外小心，一开始方瓶还可以，形态及细胞贴壁分部都行，上了转瓶之后我发现ST太难传了，第一是消化时间难控制，不知道什么时候细胞开裂，还有就是我发现细胞在转瓶的瓶颈和瓶尾贴的较多，中间很薄，纷种比例总是上不去，我用的消化液浓度为0.125%胰酶+0.05%EDTA，国产MEM+10%血清。急救啊！

zhaox

素年锦时发表于 2012-8-25 10:35

转瓶内的消化程度，我个人经验是看瓶壁上贴着的细胞变厚变白且出现轻微的划痕或是拉丝后就将胰酶弃去，然后将转瓶放回运转的转瓶机置于37°C环境中让它自行消化。至于细胞的结团问题，我的方法是在转瓶内消化好了之后可先加少量营养液使劲晃动转瓶把细胞打散。