本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky8 X0 @# ?1 M, S
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。( u& I( L" c- I' H/ t& }2 u
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
" J/ |; n8 w6 W5 f 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。; g+ e2 u1 V B3 Z! M. \$ Q
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目录4 Z K1 |5 u" u7 a0 Y3 T) w
第1篇 PCR导论
" V3 x4 d4 w9 l/ X( O; e4 F9 f* C5 N3 T1 建立一个PCR实验室1 W& U4 S- O" B& j( H2 b8 y
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
# X) Y e9 p; D3 高保真PCR酶
8 v4 j' b7 T, f. h/ J# G& Y) X4 PCR的最优化和常见问题解析
8 w" j9 K! N" c* s- M3 b x J5 富含GC片段的PCR扩增0 D! h8 e: I" m( C' u
6 精确扩增大片段的技巧
5 }" ` ?# _- I! z* G; Y7 PCR引物设计
- ? O" Z. m" G+ S3 v4 E8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
: ~2 t {1 \# m H第2篇 样品的制备
2 U& g& o8 x. ~: P& ?+ Z8 ]2 {! v9 DNA的纯化" p ^- t* V4 V* Z) W
10 RNA的纯化
8 B3 b8 L6 Q$ e! }, m3 x5 w11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达$ H4 ~4 n) z# n6 N/ V3 L1 X1 z
12 克服PCR受抑制的策略
% J) r* ~% [; _. Q8 }8 W第3篇 RT-PCR方法% P) g' s- Y) t! W7 @
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
+ i) {* R6 O! y+ ~$ v# ?14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
4 ?. D9 R6 B& v0 }6 O3 V# w15 定量PCR的新技术, w: v+ y3 o9 I3 C
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增; f' |3 [. _& N% _" E
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
& J/ U6 a4 z0 h5 W. q% q, A17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法% e8 F% [8 I& R# z/ F* T t
18 单链构象多态性分析
# C* f& }! k" g/ f5 o5 `19 逆转录酶原位PCR
& v/ \5 i# I" D5 Y7 k20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
6 Y3 x! q+ `% D- b/ A& C第5篇 用PCR分析基因的差异表达& u, Z8 [# Z% A( z7 O9 F
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用, O6 n; T. ]+ W% a9 X1 G" R' a
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因. R6 x e: ?( u1 O+ r7 A& ]5 v
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术& C, ~4 W4 W9 c- _; w, _2 J$ B* k
第6篇 用PCR进行克隆
- u8 x( B) t/ g% q; W5 m. y24 以PCR为基础的文库筛选方法) B* x8 X7 ]/ S1 n
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进& |2 Q/ C) V, g" M7 w9 {! L2 V
26 用PCR合成和分析DNA文库2 l; ~* V( U+ ?6 k' Y+ S
第7篇 PCR产物的克隆 ~4 [, p7 z4 ^: C, Q
27 克隆PCR产物的策略
4 v( @. b* l; Z- s* }+ g I( R28 PCR产物双向和定向克隆
$ ]$ S' g( P8 A2 j8 @/ C29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建+ D9 l7 @3 n7 S
第8篇 利用PCR进行诱变
3 w4 r1 q! E! [; P0 {0 c30 诱变PCR: Q5 T( B) ], D! h$ L. b: V$ B% A
31 快速PCR定点突变
$ z0 G- P" c4 Y. m" G0 H* Q32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
8 K1 S! L3 E4 w" M8 Y7 Y2 T33 流线型基因装配PCR
$ ~0 l$ |5 r# P附录1 专利- {. o* n' z$ y/ T" _+ O9 N" z# s
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰2 r1 V" f$ T" A. O: p! ~1 W/ n
附录3 注意事项
& _# Z( ?5 E0 u. a# L9 |' N/ u8 R8 T$ F. \附录4 供应商" n4 e- W& L6 [& z7 _3 x
索引
) t1 U, l6 G6 d0 c! i7 Q/ T- F! H6 ?( h- V8 Y! f9 t
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