本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky: v& V; Z* F0 y# e& D3 `
7 |7 _; d h# S$ i5 F聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
0 N- g: m! b/ {8 |6 R/ ]# d 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。5 W! d/ W W& E% @) ? I8 b) y
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
: K' `! N ?5 H3 ]3 C6 d2 `8 i5 H+ Z
目录
9 x: J: h% q7 b5 W" H) Y5 O第1篇 PCR导论' u& n! f5 D4 w5 r2 c& p& o( U& ~ V) o
1 建立一个PCR实验室
" Y" V H: |4 Q5 L1 S7 n3 Q2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
, O7 F: c0 L+ _; M* E! U3 高保真PCR酶
. B3 E% m9 k$ f% p% z6 i4 PCR的最优化和常见问题解析 k, X: _* a2 y5 @! w& I6 C, ?
5 富含GC片段的PCR扩增/ |6 m- _$ t5 j( U- w# L
6 精确扩增大片段的技巧1 T4 Q+ ~! e2 o
7 PCR引物设计; j" Z- E; A) L" r1 E
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
9 @" d# d" Y3 f$ P9 N$ X第2篇 样品的制备
; r( T0 y! `& T9 DNA的纯化) G. p3 B- u$ s, N. E3 E- m
10 RNA的纯化
% R& s: O1 ]! P11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
% \8 I, B& [ p8 m12 克服PCR受抑制的策略
! x+ X& n* a" W: k6 p1 Y第3篇 RT-PCR方法) K* ]$ r1 G+ M! ]+ Q
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
( ]/ q# i; P. H8 `" Z14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
: D0 u! g* J% w, Y2 _* S15 定量PCR的新技术- ~' T9 ^ i1 @
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
9 x. \0 u7 P# b' \% l ~8 I第4篇 PCR产物的检测:专门应用6 F: y" J" q1 y% ~. j
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
0 Q9 m1 H0 S0 [9 ?. `2 R8 e18 单链构象多态性分析
s$ U! V7 ^, {: ?* W) q w0 O19 逆转录酶原位PCR
( C% `1 E2 a% F* a6 n; M4 ^20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法: k, \6 u* X* m* t
第5篇 用PCR分析基因的差异表达0 F& U0 v. L5 K; u
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
+ T+ i8 o' d1 A, k: E! C22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因0 `$ f1 O2 n( Y$ F
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术6 R1 U G) P9 G7 H. v
第6篇 用PCR进行克隆
/ b2 o/ D- u! p24 以PCR为基础的文库筛选方法
* [2 y i! S1 _: T- y25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进/ m: R7 U. R4 f* _3 X- d
26 用PCR合成和分析DNA文库
2 {, G8 H3 v% u1 H+ o4 V第7篇 PCR产物的克隆
( _( _- h' |8 i27 克隆PCR产物的策略
; Q; {& u: L! s$ M28 PCR产物双向和定向克隆
: U7 F3 G" A% x* J29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
* |! D- f- u# _, L/ U' ?# U' O; D* {第8篇 利用PCR进行诱变
7 S+ n2 W8 Z/ r. y30 诱变PCR0 f' H& O3 q1 ^7 h4 q) ~2 B: @6 x
31 快速PCR定点突变
* S+ m$ s' z4 Z+ r, w6 ~2 c o32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
3 \. c+ z/ M2 R33 流线型基因装配PCR
5 A B; W, T& f9 V o, ~0 g+ `2 i5 w附录1 专利4 t) z) @7 {7 l! D
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰2 v6 E0 x" u' n' X, x# x
附录3 注意事项, A3 L8 X+ P: ]6 `; I6 p% v$ t
附录4 供应商8 K2 Q* J1 ^/ |) E* [
索引* @2 m, e3 B: U6 m P( v4 h
7 K* D: Y. \& ?/ N Y. ?! f' T- }# n/ Z( s) X
下载地址：* U7 G+ T, G3 U( y O% Q- K0 c1 `
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