本帖转自:http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者:walkundersky
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( [( A( z$ l& y7 J4 s$ V聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来,经过不断的开发和改进,现在已经广泛应用在诸多领域,是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。* g( u- E+ G( h; }
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer:A Laboratory Manual第二版的影印本,是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿,是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进,从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧,无所不至,令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。$ |- D6 J2 r5 _
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇,可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考,既是实验室必备的工具书,也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。( ]! j, T: `5 I
! y* u' l9 F! h/ J/ n; U+ {5 j# o6 N目录- |7 r9 c, M5 U# [
第1篇 PCR导论
; Y7 ^4 E7 g0 `! ]& M3 W' w1 建立一个PCR实验室" K& A8 K E$ A+ H5 g
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
, x5 Z. F. `* O) w3 高保真PCR酶
) [% h" x# s: |% e) t9 A# ~3 M4 PCR的最优化和常见问题解析5 D5 B$ P5 h& x- \' b5 N' F' I' e
5 富含GC片段的PCR扩增
1 h; ^/ h" x% x2 ^) n9 I" ^1 P6 精确扩增大片段的技巧! F2 S k$ y# i, _
7 PCR引物设计$ X7 s5 c$ S; x4 z2 }* a
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序# m9 w! A1 N6 t' v0 t6 y/ Z) R1 e
第2篇 样品的制备% G3 j6 J# q9 ~' r1 Z! _ S
9 DNA的纯化4 z( t" V, t7 D2 [; ?
10 RNA的纯化/ x& ?' }/ W2 c' j: Q) b
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达% J, J: I0 u4 y1 m1 X. r( B
12 克服PCR受抑制的策略9 S* u7 Z! x: W+ S# v" e0 b7 [
第3篇 RT-PCR方法
. {' \) |1 _4 o0 [" s! @$ M- O13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用. T( K- r8 U* x1 } W8 x& _
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
" U* F8 ]% e2 v1 u! A% k# {15 定量PCR的新技术; X: j7 k0 K4 C9 I
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增7 I& G, q+ F4 R( J# o
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
$ P5 H. ? X! Q1 d17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
" t3 L' X7 g5 C18 单链构象多态性分析/ @+ C% \# F T" ^1 G+ L
19 逆转录酶原位PCR
. c0 O; Q$ W: y20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法2 b8 `0 l3 a, z" X
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
5 p, N! g9 H( ~+ b/ C. u6 ^- Y21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
( K3 ^& [6 g. [. d5 c9 ]22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
9 X4 J! @2 O- V0 `. p5 f4 ]! E23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术: B1 I% `! |& K$ z! y1 Y. ^
第6篇 用PCR进行克隆
4 K1 |& |( e: B5 {6 i24 以PCR为基础的文库筛选方法! i; P9 w. t0 g1 J0 N' `7 s( b
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进7 @* S; j8 \* Y
26 用PCR合成和分析DNA文库
) R2 F( O# j$ o0 v第7篇 PCR产物的克隆- f0 N; @. L& |3 \) y
27 克隆PCR产物的策略7 d5 H& Q% C W% j
28 PCR产物双向和定向克隆
9 F# F) X/ `- W0 ~29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建) n( q' @7 O; V( R+ G, v. E
第8篇 利用PCR进行诱变
8 O# f4 v0 ^1 H4 D- R30 诱变PCR2 c) u6 U9 Z2 l t
31 快速PCR定点突变
`, N6 i3 j5 X32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
% r. P$ G% _! h; Y ^# i33 流线型基因装配PCR
! k2 C1 F6 {) ?$ z1 }附录1 专利* ?, W% E2 s( j3 {" ^, r% z
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰9 N$ ^; p- `, T& K+ L, ~! l
附录3 注意事项
( \7 z a: ?% g2 C/ m+ ^* m附录4 供应商
; e& }& R5 S* h, L8 W- X' F索引
+ i3 s- L3 `2 C. S* `+ E$ y3 u: o9 L! }$ @
+ K. H# W+ y9 I% P下载地址:! g7 l8 x# z: \" u7 A- {- k
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