本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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4 e3 R: j2 c8 r3 Y$ d聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
. y! E1 a2 h( i8 C 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。, {9 b3 ]. ]0 B% a7 t& ?1 w/ @/ D6 u
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。
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目录
/ t1 u. K# E( J第1篇 PCR导论
* R& v! K2 U0 o& M9 T: ]% ]1 建立一个PCR实验室
& \- [: N, V( g# d" M2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
( O3 O; \ ~8 d& M& y1 C3 高保真PCR酶 r4 u1 m7 d) h
4 PCR的最优化和常见问题解析( N, ^* _/ B. y6 ^9 k- V& O7 @
5 富含GC片段的PCR扩增5 K5 v8 ~ H2 a |) C
6 精确扩增大片段的技巧- [+ n: N4 B+ J
7 PCR引物设计
0 i, H; s4 {! e, n+ D% O8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序% c; Z7 U( m1 o& E q
第2篇 样品的制备8 j1 ]$ C8 l H- ?7 z9 y. K, C) g# H) h
9 DNA的纯化. \7 F1 B8 L; C7 ` _9 L
10 RNA的纯化
3 x; S; z# C( P11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达+ s: X+ k& X7 c2 C" O1 w- z
12 克服PCR受抑制的策略
( Q% \; a+ I# X. N第3篇 RT-PCR方法, {) G% J2 D# G+ W, g7 A
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
+ H; U) b: X7 k# K14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler/ q5 K/ u0 Z+ Q: B
15 定量PCR的新技术
2 T: h. e3 c2 w5 o9 q! i" K16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
; [: B; H% i/ P2 H, U' p# c第4篇 PCR产物的检测:专门应用
& m4 k# g: V' x' t' O9 g- X17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法5 e- Z% Q/ [ U/ X% c1 \3 z- O
18 单链构象多态性分析
$ {) O2 A N$ G! B4 e19 逆转录酶原位PCR; o: Z# D- t% f6 a. l
20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
! Y; H7 i* L" B h第5篇 用PCR分析基因的差异表达
; k- j g" ^/ Y4 T7 }21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
' o4 v* x' o @22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因 M5 r4 i s2 A1 ^* C$ |+ E1 }' M6 l
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术6 x# }, d4 u$ ]: q6 l$ z0 L5 S7 ^/ ~7 h
第6篇 用PCR进行克隆
* Q- E5 z; Y9 T8 s& n2 I24 以PCR为基础的文库筛选方法
$ R8 @3 }9 V0 X' V/ X8 n25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进) Y& B# V. k3 V( J; |8 r! @$ ]
26 用PCR合成和分析DNA文库( R" i+ a/ w+ s: S0 T/ F. l) H
第7篇 PCR产物的克隆
! b' h5 a/ ?+ x3 j27 克隆PCR产物的策略/ E9 H1 j6 _$ Q6 W0 J8 o
28 PCR产物双向和定向克隆- A; Y/ }# w, h) L1 q( z
29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
, }8 U7 f' O) B+ Z& S3 s1 r ]第8篇 利用PCR进行诱变5 r/ Y9 Y+ J6 ]/ |
30 诱变PCR& }6 |# ~& \" w
31 快速PCR定点突变6 ~5 H5 `* }* U3 {- z
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
2 M) |, X: `! I33 流线型基因装配PCR0 M1 ~" W, M5 F T
附录1 专利
( ]& f1 u) m1 l5 H& g附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰/ K) F& Q- g4 b5 n& c( Y6 v. t
附录3 注意事项
* p% f. H# w2 _$ w2 P, L附录4 供应商, C2 m+ e& I. x6 h
索引
! K3 \, S+ M' ^9 G3 X$ e) M
1 K5 k" }8 T( T, f: J2 ^0 t
$ W1 b' R, f5 d [! l* c3 J下载地址：
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