本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky0 q4 j3 ?" F1 d% j) v3 A# {1 `
7 V+ {& Q9 F/ W! ^3 @聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。/ x& v1 d g$ h
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
8 W' F# M' |6 v$ {0 a 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。- i$ `9 X. G) c- k' d1 ^; m# A
7 s; e) H- [3 r& r2 F! \3 y* Q/ h
目录
9 A) K' A: h2 {2 u# b第1篇 PCR导论* n7 ]1 W# y, D% H% R7 g9 Z+ R8 x
1 建立一个PCR实验室 W' i+ F- c; e" [- J9 p( @8 t
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
. h: h5 ?% L* j3 高保真PCR酶$ _. z* |2 _- r' A' [6 W' C# |$ U
4 PCR的最优化和常见问题解析! b* o" ~+ L% d
5 富含GC片段的PCR扩增, q6 G8 M' t0 ~) w) _8 |
6 精确扩增大片段的技巧" V! V8 X- v, @0 O$ z
7 PCR引物设计4 R- x% |. B' x+ C: H1 C6 T- H2 T
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序. } p0 m/ G: z% F( e
第2篇 样品的制备0 _+ g5 @- Y' G* E, K
9 DNA的纯化
% B) ~+ i8 [( Z5 y) e3 R/ q10 RNA的纯化) P+ d2 i t: v0 i, H; e4 O
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达3 P- C$ K* ^7 H) ~2 m# g! m0 S
12 克服PCR受抑制的策略
' H2 A+ i/ Y: y( X) A第3篇 RT-PCR方法 X( P h& S6 m _4 {
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用3 i6 e( l1 i5 c7 K) U
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
" ~$ ?+ a* Y+ H# a* x: D( D15 定量PCR的新技术1 X, [5 \7 N7 q5 D5 [* j2 T$ S# R
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增- @% N6 i8 Y7 R$ @9 K* Y
第4篇 PCR产物的检测:专门应用
0 I6 V1 t' @: e9 Y. d2 ]17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
. c6 _3 v+ e& x* h* ?3 o18 单链构象多态性分析8 J' L3 |' D! O. X% z T
19 逆转录酶原位PCR
& u) M% j8 T: p6 u. `# z8 D* a20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法( t3 ~# P- L* A1 e
第5篇 用PCR分析基因的差异表达- }4 _' j$ ~' M! }$ E3 d$ ~! m
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
2 Q+ I/ T3 \' d5 b, B8 g22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因! W1 n& U; I% X( w3 j
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术2 W! h! J' Z* ]7 [1 C3 ]' w
第6篇 用PCR进行克隆
5 u8 P, N/ n. x3 t24 以PCR为基础的文库筛选方法
1 \: F2 o* o1 f c# N, B/ M3 c, f25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进5 j, U( P' V% \( i2 M& L: I
26 用PCR合成和分析DNA文库
" o( t, D o/ s第7篇 PCR产物的克隆, |. t8 {! `1 `$ }, v: d
27 克隆PCR产物的策略4 U0 P2 i5 c9 }9 Y6 E
28 PCR产物双向和定向克隆
1 u' p( C: {6 O8 Z4 Z% @. i29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
% ?% d0 }4 L; Q3 {0 P) C第8篇 利用PCR进行诱变
' P. X c9 m% u$ X3 R0 P" X30 诱变PCR8 E8 C1 w6 U# O/ P. ]
31 快速PCR定点突变 L; M% P5 F. c7 W. @& Q& N5 n/ {
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因9 I ^# }6 W* V+ k @% h" \
33 流线型基因装配PCR
- O* }2 n3 w! K; J6 [; i# T/ s# ?& a附录1 专利
6 y# x0 m* v; \! ]附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰# T) y0 `3 t* b
附录3 注意事项, ^9 p/ G4 e9 u0 J8 R) }
附录4 供应商
1 h. c+ M3 f+ B% f索引. t# u s0 @# A: G, [
) F3 m" ~8 ^0 [: m# v6 F, \0 R" ? E% r0 L0 K: N# h! D
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