[转移贴]犬瘟热病毒纯化

hantavirus

原贴由wangxj06发表于 2010-7-20 13:40

我想请教一下大家，使用密度梯度离心法纯化犬瘟热病毒时，用多大的离心力，具体如何进行呢？

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sdauvet 发表于 2010-9-27 20:09：

一、先以4500rpm将细胞培养物离心15min，弃沉淀，接着向上清液中加1/4体积氯仿，充分混匀后，置4 ℃1h后，5000rpm离心20 min，取上清。
二、然后用冷冻真空浓缩水相到1/10。将该浓缩液做30%～60%不连续蔗糖密度梯度离心。
在离心管中依次加入30%、45%、60%的蔗糖，最后加0.5mL浓缩的含病毒样品，在冷冻
超速离心机中，于4℃下以20000rpm，离心3h。然后用灭菌注射器取出各组带。