本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。. ?1 U4 Z4 P" A' q$ ~) J, A, @
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。
8 C N8 \+ v/ q5 N1 s- _. b0 l# o 本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。0 k/ E$ t0 c# X! o5 E
1 P1 X0 l5 ]9 f' t6 Q5 b% ?
目录, i: e: D8 B B8 M2 l9 M$ b
第1篇 PCR导论
' ?/ s0 W" B+ a- v) B2 P; d1 建立一个PCR实验室
# J# `6 p7 K' E/ D6 `+ W2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略) t0 }% T' Y& ^: _% a' A0 r
3 高保真PCR酶
: M$ W) p: p) Z3 l9 o5 [ H4 PCR的最优化和常见问题解析) S. K" D9 m# E' s* Z
5 富含GC片段的PCR扩增3 ?# k$ Q+ V- o2 T
6 精确扩增大片段的技巧& M2 I+ J1 Q6 D t. I6 R
7 PCR引物设计
0 C0 J s, k5 B( s7 P8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序/ c/ x- {: `" p+ M4 U B
第2篇 样品的制备! @+ y# T* i$ Z5 L
9 DNA的纯化$ \5 ^2 i5 f) M; W# d' X
10 RNA的纯化 ]: F$ L8 @0 N1 m/ D+ a# b$ B% M
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
. V1 P' E; X& R$ C$ J: e! `12 克服PCR受抑制的策略" ?7 W/ Q( _+ R; c5 Y) _
第3篇 RT-PCR方法
. e8 m5 ?. v+ O, P6 [% X P: ]13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
4 X5 U Z2 ^5 k2 a" h8 ^8 @14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler, @ A, p" S3 A2 d6 y2 ~& N
15 定量PCR的新技术
2 c" O4 Y5 C) L! }16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
7 o3 _ Y: {* y+ z第4篇 PCR产物的检测:专门应用
: ~4 _ E3 E2 }" R& d17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法8 J& w5 ~4 g/ m+ r
18 单链构象多态性分析
3 v s1 X1 a+ Q' O( F/ g/ U19 逆转录酶原位PCR
# b4 }. D: |/ \+ b5 l: y( y! T20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
0 j. x- i) g, I第5篇 用PCR分析基因的差异表达! Z2 E& ?) L+ N Y" G, n( U+ J
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
# u$ |1 o" V; Q Z( v22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
0 [6 [/ l. m! T. N5 {2 W& [5 D23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术& }, N) b9 k+ b' U% T& H# X
第6篇 用PCR进行克隆1 e) y2 A# V/ z5 _ [
24 以PCR为基础的文库筛选方法: K- b6 g4 ]5 j. R+ J
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进! S' v' R8 X, `! H/ N6 U8 O* [9 z, y
26 用PCR合成和分析DNA文库
! ~0 {9 s* P3 h2 G! W" Y9 g0 Y- u. b第7篇 PCR产物的克隆
# r& u( Q, v. D3 n3 g8 L27 克隆PCR产物的策略- N P/ J: }; H, R+ ]6 z# H
28 PCR产物双向和定向克隆
7 A4 Y' x0 h n29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
; F4 m' Y& b& a. I1 V9 u第8篇 利用PCR进行诱变
) S) s O% T$ k6 n1 p30 诱变PCR' h- C: S/ U6 w' Y" n0 s
31 快速PCR定点突变
' o2 S( t9 a) N7 o c32 利用PCR来突变和合成新的重组基因& \7 ?, ?6 `2 e6 A" E
33 流线型基因装配PCR7 T" g8 E8 K/ m/ u! i
附录1 专利
6 O! a$ z7 t0 e) W, g5 e) X附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
. |, B' L' ~1 y7 q$ Z( N附录3 注意事项
& _3 y2 N1 V* B附录4 供应商
% W& ?4 E: {! K R索引
8 Y2 B% n& b" i" U' y6 u/ q, ?# v7 f8 J" f: e3 R1 v; h; O
$ o; {1 L1 r( U5 |# L8 y+ E下载地址：
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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