本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky
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2 P' R7 J: r8 q& c1 b7 q$ H聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
( X1 {% D- \7 f 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。; H: b. A$ k Y4 y' b* K2 M/ T
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。. y o( {( j/ k% m. ]7 J3 w
- g4 t' A& t* P) A3 s$ X/ l" b目录
4 A q7 F1 F( _( B. A7 Q+ S3 o第1篇 PCR导论
0 i& z) o! ?% u# X( `" ^1 建立一个PCR实验室
0 g8 f8 {$ C! G2 C+ V4 @" h: ?2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
% N+ j: J: d: V0 s5 O- B3 高保真PCR酶
" N1 G% c. d4 ^3 Z5 I/ n9 f: _; m4 PCR的最优化和常见问题解析( x* ?+ Q- ?: e! e
5 富含GC片段的PCR扩增
& N/ T ?5 Z P% c% U6 精确扩增大片段的技巧
" s6 \- v" l K7 PCR引物设计; R; T* U- Y0 @5 z
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序
0 U, H) X @) w8 O/ T第2篇 样品的制备
: ?8 \9 L$ d% S9 D" Y: d- T, a7 T! y9 DNA的纯化1 z2 V6 A9 j b
10 RNA的纯化
( {/ a% ^0 J" J5 h* |$ Q( ~7 `11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达, I" V* L3 u) d: N
12 克服PCR受抑制的策略0 q* n1 d: L! I8 I6 r
第3篇 RT-PCR方法
6 f2 o2 D6 n" A6 L# s! s13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用2 N0 b& x" y$ p; Q# o0 j
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler" ]& w( W0 J: W. s
15 定量PCR的新技术
# F4 q+ x/ p) U8 M" i# @1 e16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增( a9 r0 _* m, C% E/ P
第4篇 PCR产物的检测:专门应用: k4 { b* j+ M8 `0 {! R7 s
17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
+ V) F( }9 b7 `, ]. o' [! D18 单链构象多态性分析( V/ I, m/ s- W' R. u' p$ o& v
19 逆转录酶原位PCR
' q8 i( C1 D% v! I- t8 M20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法0 ], D" W1 i+ }3 J
第5篇 用PCR分析基因的差异表达
: J% t. f, l! V# e; T21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用
, \1 b/ t9 h8 v* t/ x3 ?22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因- S8 y4 X& w3 O( W) y$ ?8 f
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术
9 F2 S! Y) A" G. `' R第6篇 用PCR进行克隆9 ?2 b( x2 v. i* j3 O5 X/ E
24 以PCR为基础的文库筛选方法2 z7 _% p% T6 S0 f# _. C
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进 _! ]4 ^5 y x" T, q0 L3 `) | s
26 用PCR合成和分析DNA文库' h5 _8 d' Z, q. c( {* d
第7篇 PCR产物的克隆
$ h7 K8 l G8 a2 J* @2 a' ^8 _6 h27 克隆PCR产物的策略+ Y3 L6 P, D& j& N4 N( P! P
28 PCR产物双向和定向克隆
) B+ Q9 s5 r1 e, C, g2 H29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
, O' V$ l. e8 X) r2 n+ q" |% s第8篇 利用PCR进行诱变
1 n% q0 b% y0 h1 ?30 诱变PCR
" a t" ]( l% B+ C" H7 v# z5 U31 快速PCR定点突变' `; Y8 P7 L: i- S& J* Z
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因, x+ c. a7 U* d6 B4 }, Z5 i4 r' R: ~
33 流线型基因装配PCR
" R: C7 t( Y1 |) D/ t附录1 专利
* q4 a& P/ F. }" L附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰& k* ]. _5 g$ F" o
附录3 注意事项5 R# y' m: @2 I" w
附录4 供应商0 H* A3 Y& K3 a
索引
8 p6 b% F' v! ?' e. f/ n6 J5 S! P! \: M
4 z# g: T" z5 G4 K3 F
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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