本帖转自:http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者:walkundersky- G6 ~: |* g$ f0 g, |5 Q) k
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来,经过不断的开发和改进,现在已经广泛应用在诸多领域,是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。
# N% q* n" @: y1 k 本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer:A Laboratory Manual第二版的影印本,是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿,是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进,从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧,无所不至,令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。5 N1 B0 ]/ D. K z( q
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇,可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考,既是实验室必备的工具书,也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。% e1 c% ?" _$ d {0 z
9 m% [5 o( |5 k2 M目录
. ^- M$ Z8 Y8 T第1篇 PCR导论+ l- l J( p$ ?) C& s
1 建立一个PCR实验室! r4 p/ f5 @1 D: }9 u/ g
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略
8 ~& R- ~5 ?1 R! c/ d4 L3 高保真PCR酶
B @2 _( V, i% R5 X1 j( k4 PCR的最优化和常见问题解析$ K/ a/ Z i y/ W. ?# J7 W
5 富含GC片段的PCR扩增9 r1 @* L+ u$ c9 }8 I9 U
6 精确扩增大片段的技巧
# P/ y+ Z8 K0 |* g7 PCR引物设计+ Y0 E' t6 k. ^% ]
8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序8 K( W6 y/ h$ C2 w7 c
第2篇 样品的制备0 r( L/ w l2 j7 A# }* j
9 DNA的纯化
! h: B1 Q. x" Q! w& D. V- n% g10 RNA的纯化
1 d [9 w& ~7 ]2 I( _9 q' x! v11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
7 Y6 T9 e" P5 }4 K( ^$ `, E* l12 克服PCR受抑制的策略" a* o( i3 y# u" ~ v
第3篇 RT-PCR方法
# D v$ v/ O; \; k13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用
& x: u; }& Y' v14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler% O2 |2 [& `. E' j* I+ q8 I$ X
15 定量PCR的新技术
% @4 o& R$ f! W' ^16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
) @( F6 a6 O' G9 r) t K第4篇 PCR产物的检测:专门应用
3 G+ x3 x1 D* e, i, M* @$ ^17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法3 E& }9 M S J5 e4 F4 c
18 单链构象多态性分析
) |2 T5 h: n9 a* f19 逆转录酶原位PCR
+ E9 K! W7 k2 n20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
% I/ Q8 k+ r; v8 |& L9 ^0 D第5篇 用PCR分析基因的差异表达
+ l& h: L1 z2 Y, g) ]/ T5 d21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用( [1 S9 S% o& r; j6 E3 u
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因
/ L2 M8 v) e! D. ]. C* S23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术9 s4 J+ f9 A' p; m
第6篇 用PCR进行克隆
3 Q. W- x/ x! s24 以PCR为基础的文库筛选方法
! w" k# H6 h3 L; c! f25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进5 Z2 n* L% S: X6 F9 C$ e
26 用PCR合成和分析DNA文库
3 Z2 P% G5 h- h- G0 D- a- _- \第7篇 PCR产物的克隆
- x# H I& M& W7 L( M4 Y N27 克隆PCR产物的策略
& \, D7 q+ o6 M" I* |4 O28 PCR产物双向和定向克隆
: F. l" I2 U7 y29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建
9 r7 v- `8 g$ f: H Q' ?第8篇 利用PCR进行诱变/ z! x9 Y- p6 l+ ?, e: e
30 诱变PCR+ B2 |, S& S1 g
31 快速PCR定点突变" r% J* A1 N9 m, G q+ W- Z1 K
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
- t. z; z% {% m0 m- B33 流线型基因装配PCR
1 V6 s" T# {5 q' b+ H l附录1 专利
; {. c: E% t) c$ d附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰
5 {1 ?- T; T7 @( ^4 Y附录3 注意事项0 W l$ q7 e% T9 B7 G2 c3 ~
附录4 供应商
4 L: X1 |9 P% [8 A* C索引+ e: ^% \" z' ^, h: H# t* }/ C
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