本帖转自：http://biosky.haotui.com/thread-12071-1-2.html 作者：walkundersky# X9 E' L! x+ f8 r
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聚合酶链反应(PCR)自发明至今的20年来，经过不断的开发和改进，现在已经广泛应用在诸多领域，是分子生物学、临床诊断、法医检验等实验室的常规技术。6 f! G N: s- [' E B6 u
本书是美国冷泉港实验室出版社PCR Primer：A Laboratory Manual第二版的影印本，是第一版的全面更新和升级。本书由从事PCR研究的专家们共同研讨和撰稿，是一部最新、最权威的PCR技术实验手册。其内容从最简单的PCR操作到最新的技术改进，从最基本的PCR技术到各种奇思妙想的PCR应用技巧，无所不至，令读者目不暇接、备受启迪。具体内容包括PCR 导论、样品的制备、引物设计、PCR产物检测(定量和分析)、RNA样品的PCR、PCR介导的克隆、PCR法制备突变体、其他扩增技术等。每个操作都配有疑难解析和完整的参考文献以供答疑、检索。4 m+ X8 j- i, `5 o6 x
本书是《分子克隆实验指南》的姊妹篇，可供从事分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物化学以及医学各个领域研究的科研与教学人员参考，既是实验室必备的工具书，也是研究人员开阔眼界、拓展思路的不可不读之经典。3 Q) K3 K5 H6 Q' [$ d+ I6 W
2 @+ P' i5 w4 j; a9 G! F4 @
目录' F# s2 R* y9 K' y
第1篇 PCR导论
+ K& ~5 C% @4 t6 T. }2 M1 建立一个PCR实验室* s& o d. [, R* L2 C6 _; B1 W3 E
2 PCR残留污染的处理:一种酶学策略9 b# E: i% H; ]& v; I+ @1 L
3 高保真PCR酶 {% O7 o& [3 j1 C. Z4 V
4 PCR的最优化和常见问题解析+ p% }" A; N9 u9 J3 T3 R# ~% G
5 富含GC片段的PCR扩增
% v8 V; @) P0 j. K6 精确扩增大片段的技巧
, h+ v5 U/ ^* U& X7 PCR引物设计
% r' m* Q: L! {$ q3 {; t) Z8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序- U, g7 Q9 @ K8 ?: W+ e
第2篇 样品的制备
8 G; A2 X% I7 i5 N( d' W- Z. Z: [9 DNA的纯化
. b8 H: [8 S1 P B5 v10 RNA的纯化 G' t8 D8 l3 R- c }& b
11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达
! ]- [( G: F5 R' u12 克服PCR受抑制的策略9 r$ B) g% t; q+ Z3 r3 ~; p
第3篇 RT-PCR方法3 Y, x: ` H7 {4 E
13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用2 S$ m+ j1 n: V* L
14 四种实时PCR检测系统的比较:Bio-Rad I-Cycler、ABI、7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler
* W6 f& g% P- w$ Z) A3 {! ^9 Q15 定量PCR的新技术$ q4 q2 g5 g U( |) @" v0 A& x
16 RNA的扩增:用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增
! x, U1 }# G# D' g* [+ Q第4篇 PCR产物的检测:专门应用
- d6 Q; d' ]& h+ i! {7 e2 o/ B17 杂合性的丢失:一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法
% Y( `6 j5 ?% G( d18 单链构象多态性分析
j: b: e$ i: ~, S( M6 [19 逆转录酶原位PCR
v* T Y) E7 ` ^20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法
! c7 M" N+ E3 C5 z6 v$ J0 @% n: _第5篇 用PCR分析基因的差异表达6 T' I( p# |3 y+ ^$ L/ ]! U
21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用% V7 I- _$ `8 C, f) c: l" d! t
22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因! i3 t8 R7 k- t: N
23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术6 R G% l9 @$ O( T
第6篇 用PCR进行克隆
2 [- ^) Q- g/ A24 以PCR为基础的文库筛选方法' F: |; C; L3 Y- I
25 经典RACE(cDNA末端快速扩增)法的改进7 n: H: u8 `1 {) G
26 用PCR合成和分析DNA文库/ d5 \- d' @' H# a o
第7篇 PCR产物的克隆5 Z+ d; p5 Q+ _7 w& ?$ i
27 克隆PCR产物的策略
/ Z+ C8 o; w) e7 r9 e8 h( X28 PCR产物双向和定向克隆
7 u5 I" B! b, W, q29 核糖克隆:用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建! M) f! P5 V" G. F, @+ D4 R0 `
第8篇 利用PCR进行诱变
$ A$ ]% u3 [# `30 诱变PCR
6 J! W. O3 c& Y/ f31 快速PCR定点突变2 W2 {& C' s4 q, t) a2 d& G, I
32 利用PCR来突变和合成新的重组基因
_; C5 i I. c: W0 n33 流线型基因装配PCR* C! x% A& @+ t$ I; R
附录1 专利7 N2 R* B' m0 W
附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰7 V% D* |, `3 b; d1 G$ ^
附录3 注意事项
: ]. G' M [) t# { G附录4 供应商
) k- j. Q% E J" u索引
: D9 B3 B$ P/ R) Y6 B V/ I0 s2 i2 Z1 S
- ~' ~) N# E5 _2 G
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发表于 2015-2-3 16:35:27
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