求助2BS细胞的培养经验

douban

我培养的2BS细胞已经是50多代了，最近出现了培养5~6天都长不满的现象。我拿到的细胞种子是51代的，传52代时能长满，但是密度不高，53、54时就不行了。难道是寿命到了？
另求助于大人们，这个细胞很难养吗？一般几天能长满？消化的经验是什么？我用invitrogen的0.25%胰酶（含EDTA）合适吗？，还有什么经验心得请大家多多分享谢谢！  

hantavirus

50代的是不是代次老了些？