[转移帖]HBV cccDNA 提取

cao1976

原帖由szy3282 发表于 2012-7-17 15:35 ：

大家好，我是新手，请多多指教！！
我想问一下一般HBV cccDNA是怎么提取的？ 现在检测的报道不少，但提取的文献不多。有没有一个大家都公认的比较可靠的提取方法？我想先从HepG2.2.15开始，然后再做组织内提取。
谢谢了！

cao1976

bigben发表于 2012-8-8 17:46：

HepG2.2.15、血清里面cccDNA都很少，里面大部分是RcDNA
提取的话看文献其实普通的提取基因组DNA的试剂盒就可以，然后再用绿豆核酸酶或者PSDA（不降解质粒的ATP依赖DNA酶）处理，只保留cccDNA

cao1976

szy3282 发表于 2012-8-10 10:57 ：

谢谢！ 大概也就这个思路了。我想先做个类似CHIP的交联，把蛋白和DNA固定下来。不知道这个会不会影响后续的DNA提取和PSDA处理～～只能试试看了。