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[交流讨论] 哪些原因可致HBsAg检测出现假阳性?

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发表于 2015-8-26 11:50:49 | 显示全部楼层 |阅读模式
 目前国内临床多采用ELISA 法检测乙型肝炎血清标志物,它以免疫学反应为基础,将抗原抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合,通过洗涤除去多余游离反应物,以保证实验结果特异性和稳定性,但其步骤多,影响因素多,各环节均需严格按操作规程进行。

  假阳性可能导致因素:

1.内源性因素

  血清是最常见的ELISA标本,大约有4O 的人血清标本含类风湿因子、补体、嗜异性抗体嗜靶抗原、自身抗体等非特异性物质。它们的存在对El ISA测定有干扰作用易造成假阳性结果,应该在不同时期多次采血以减少假阳性率。

2.外源性因素

1)标本溶血:各种人为因素引起标本溶血,使细胞内过氧化物酶进人血浆,并吸附于细胞及纤维蛋白原上,增加加样后微孔板洗涤难度,引起HRP活性增高,造成非特异性显色。阮乐幸口 发现溶血标本OD值较高,且与溶血程度成正比;

2)标本受细菌污染产生非特异性显色;

3)标本保存不当;

4)标本凝集不全血清中残留纤维蛋白原;

5)比色时间:有研究 显示双波长法比色,延迟10 min或更长时间比色,结果有不同程度的“高检出”现象,因此检测应保证终止显色后及时比色;

6)人为因素:试剂因素、加样不准确、孵育温度及时间、洗板次数、显色液的加入方式、标本有污染和操作不熟练等。

  实验结果提示要做好HBsAg检测工作,提高检测质量,必须选择国家卫生部批检合格试剂盒;标本空腹采集无溶血,血清完全分离;操作严格按说明书操作规程进行;临床检验各室应根据目的不同、项目不同分别采血,防止转血过程中标本污染可能,导致结果错误的发生;对于阳性标本或可疑标本采用不同厂家不同方法及重新采血复查。

  通过易造成病毒性肝炎检测假阳性结果进行分析,在实际工作中应引以借鉴,做好标本的接收、处理、检测、报告及保存等工作,尽量减少其检测干扰因素。而现阶段由于方法学特定的局限性及试剂盒客观存在的质量差异,抗原抗体结合有一定线性区、等价区和抗原过剩区,只有当HBsAg浓度在线形范围内,S/CO值与HBsAg浓度呈正相关,故临床报告化验单时,不宜单纯报告阴、阳性,且建议临床规范化验单,临床医生在化验单上详细注明患者病情和分期。


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