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[原创] 利用GFP来筛选互作蛋白的方法讨论

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发表于 2016-12-10 22:12:09 | 显示全部楼层 |阅读模式
现在已经有多种方法来筛选互作蛋白,其中一个方法是将标签融合到目标蛋白中。而用的比较多的标签之一就是GFP,那么问题来了,在融合之后,筛选互作带白的时候,我们应该注意些什么东西呢?请大家一起来讨论下。。。。

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发表于 2016-12-11 10:49:57 | 显示全部楼层
用标签做对照?

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donggua + 20 很给力!

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 楼主| 发表于 2016-12-10 22:14:04 | 显示全部楼层
有几个问题
1、在筛选的时候应该添加什么样的对照?
2、如何减少在筛选过程中的非特异性互作?

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 楼主| 发表于 2016-12-11 23:13:13 | 显示全部楼层
序道 发表于 2016-12-11 10:49
用标签做对照?

是的。例如如果用gfp作为标签的话,一般用gfp标签蛋白作为阴性对照。

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 楼主| 发表于 2016-12-16 09:28:35 | 显示全部楼层
还有一一个现象,我们在实际筛选互作蛋白的过程中,标签蛋白自身也会存在一些潜在的互作蛋白,通过阴性对照我们可以排除这部分。当然,也有标签蛋白与诱饵蛋白都与某种蛋白互作的可能。。。
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