[转移帖]疫苗史学习：疫苗之父Pasteur

hantavirus

原帖由论坛rojjer发表于 2008-1-6 14:39

疫苗之父的Pasteur对人类的伟大贡献不仅在于他证明了微生物的存在，而且是他史无前例地用物理、化学和微生物传代等方法有目的地来处理病原微生物，使其失去毒力或减低毒力，并用此作为疫苗给人接种而达到能预防一批烈性传染病的目的。Pasteur于19世纪末在疫苗研制领域的先锋作用和卓越贡献引起了第一次疫苗革命。虽然Jenner比Pasteur早100年使用了牛痘苗来预防天花，并为200年后在全世界消灭天花立下了不朽的功勋，然而人们并没有将他誉为疫苗之父，这是因为当时科学技术条件的限制，Jenner不知道天花是由病毒引起的，更不可能有目的地用不同的方法去处理病原微生物而研制出疫苗来防病。Jenner细致的观察、长期的经验和大胆的实验使他获得预防天花的成功。Pasteur为了纪念Jenner医生对人类的贡献，将疫苗一词创语为“vaccine”，意思是可用于免除瘟疫的东西。



    在19世纪的最后二三十年，一个又一个被相继发现的细菌是引起人类和动物烈性传染病的罪魁祸首，例如霍乱弧菌及伤寒、炭疽、鼠疫、白喉和结核等杆菌。Koch发明的在固体培养基上分离细菌纯培养物的方法为Pasteur研制疫苗铺平了道路。Pasteur首先观察到引起鸡霍乱的细菌在培养基上培养两个星期以后便失去了致病的毒力。他发现用这种陈旧的培养物给鸡接种后不能使鸡感染得病；然而重要的是，如果再用新鲜的强毒菌来攻击这些鸡，它们都获得了保护而没有得病。Pasteur的结论是细菌的陈旧培养物发生了一些变化而减低了它的毒力却保存了免疫原性。Pasteur应用他的理论使引起牛、羊和人类炭疽病的炭疽杆菌减毒。他发现将炭疽杆菌在42-43 t培养两周以后，细菌失去了毒力而且不产生芽孢。在这些早期的实验中，Pasteur建立了免疫预防的原则，他在接种程序中，首先使用减毒十分彻底的细菌以保证安全性，随后再用低毒细菌加强免疫来增加免疫原性。Pasteur于1881年5月5日在法国进行了具有历史意义的公开实验。24头绵羊、1头山羊和6头牛首次接种了彻底脱毒的炭疽疫苗，然后在5月17日用未完全减毒的细菌作加强免疫。5月31日对免疫动物和一群同样数目的对照动物用强毒炭疽杆菌攻击，结果未接种疫苗的对照动物中，绵羊和山羊全部死亡，4头牛病情严重；然而在免疫动物中只有1头绵羊死亡。实验的成功使得炭疽疫苗在短时间内在法国广泛使用。至1882年初，共有7．9万头绵羊被免疫，并获得了良好的免疫保护效果。



    人类于1884年首次大规模使用疫苗来预防霍乱，距Koch分离到霍乱纯培养物仅一年时间。这是一种用含有减毒霍乱弧菌的肉汤做成的活疫苗。当时在西班牙的霍乱流行区有3万人注射了这种疫苗。但是这种霍乱减毒活疫苗被大量的其他细菌污染，而其中的霍乱弧菌数量只占一小部分。免疫保护效果不理想和严重的副反应都与污染的其他细菌有关。1891年根据Pasteur的疫苗原则，将霍乱弧菌在空气中39T连续培养以达到减毒目的。其后在印度的几个临床试验结果都证明了霍乱活疫苗的保护效果。由于在大量制备和疫苗标准化方面的困难，后来中止了这种疫苗的使用。Kolle博士于1896年将在琼脂上培养的霍乱弧菌加热灭活做成死疫苗并加入0．5％的酚作为保护剂。这种死疫苗于1902年首次在日本的霍乱流行区大规模使用；后来在20世纪60和70年代又在孟加拉国、菲律宾、印度尼西亚和印度进行了设对照的随机临床试验。结论是霍乱死疫苗有很好的短期保护效果。



    Pasteur及其助手在获得炭疽疫苗的成功以后，将注意力转到预防狂犬病的研究中去。虽然他们不能像分离细菌一样培养出狂犬病毒，但是他们确定引起这种传染病的微生物存在于患病动物的脊髓和脑组织中。Pasteur将患狂犬病动物的神经组织注射到兔子的脑膜下，待兔子死亡以后，将它的脊髓取出再给另一只兔子注射，可以将狂犬病在兔子中一代一代传下去；然而他们发现如果将脊髓干燥15天后再给兔子注射就失去了传染性。Pasteur将干燥的兔子脊髓溶解在盐水中，给动物每天注射1次，连续注射14天而获得免疫保护力。Pasteur在法国给两名被患狂犬病的狗严重咬伤的病人注射了这种疫苗后挽救了他们的生命。



    以Pasteur的出色成就为代表，从19世纪末至20世纪初在世界上掀起了第一次疫苗革命。其中卡介苗就是细菌减毒活疫苗的成功例子。Calmette和Guerin将一株从母牛分离到的牛型结核杆菌在含有公牛胆汁的培养基上连续培养213代，经过13年后获得了减毒的卡介苗，称BCG(BacillusCalmette-Guerin)，这种菌苗不能再使敏感动物豚鼠感染结核病。卡介苗于1921年首次给一名新生儿经口服途径进行免疫，婴儿服用疫苗后无任何副反应。这名婴儿在其母亲死于肺结核病后与患有结核病的外祖母一起生活，虽然他与结核杆菌有密切接触，但是在他的一生中却没有患结核病。由于卡介苗既安全又有效，到了20年代末，在法国已有5万婴儿服用了卡介苗。20年代以后，卡介苗的使用由口服改成了皮内注射。从1928年开始，卡介苗在全世界广泛使用。至今已在182个国家和地区，对40多亿的儿童接种了卡介苗。根据WHO扩大计划免疫的要求，现在每年仍有1亿多的新生儿接种卡介苗。