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[疫苗技术] [转移帖]疫苗灭活剂选择

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楼主
发表于 2015-10-27 16:59:46 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
原帖由论坛会员cnbio6216发表于 2008-10-15 09:44 |

疫苗灭活剂β-丙内酯(Beta-Propiolactone,BPL)
灭活是指破坏病原体的生物学特性,但尽可能避免影响其免疫原性或破坏血清中补体活性的过程。常用的灭活剂有甲醛、β-丙内酯(BPL)或其他有效灭活剂。
甲醛是一种有强烈刺激性的致癌物质。其既可作用于病毒含氨基的核苷酸碱基(如A,G,U),又可作用病毒壳蛋白。作用于病毒壳蛋白时,易使蛋白质发生交联或病毒颗粒聚集,不能再作用于壳蛋白内的核酸。这样,病原体蛋白的抗原性会遭到严重破坏,并可能有病原体存活;用甲醛灭活时间长,一般需要在37-39℃处理24h以上或更长时间。并且灭活的效果易受温度、pH、浓度、是否存在有机物、病原体的种类和含氮量等因素影响,在研究中应引起注意;残留的游离甲醛,若随疫苗注入机体后,会产生制激性反应。
而β-丙内酯(BPL)在国外已广泛用于各种疫苗的灭活。它是一种杂环类化合物(C3H4O2),沸点155℃,常温下是无色粘稠状液体,对病毒具有很强的灭活作用。
作用机理:作用于病原体DNA或RNA,改变病毒核酸结构达到灭活目的,而不直接作用于蛋白。
1.        特点:直接作用于病毒核酸,保持免疫原性,强灭活效果。β-丙内酯(BPL)直接与病毒核酸作用,而不作用于壳蛋白,不破坏病原体的免疫原性。
2.        极易水解,无残留,并且水解产物无毒无害。大剂量β-丙内酯(BPL)虽是一种致癌物,但极易水解,在37℃水浴水解2h后消失[1, 2],其水解为无毒性的人体脂肪代谢产物β-羟基丙酸[3] 。另外,由于其能在疫苗液体中完全水解,不必考虑在成品疫苗中的残留。
3.        灭活时间短,缩短了疫苗的生产周期。37℃仅需2小时β-丙内酯即可完全水解,灭活时间短,从而显著地缩短了疫苗生产周期,提高了经济效益。
总之,β-丙内酯(BPL)作为疫苗灭活剂,可直接作用于核酸,对病毒的灭活能力很强;不破坏病毒的血凝素抗原, 保持病毒良好的免疫原性;其水解产物对机体无害,接种反应轻。故早在1984年就被选作狂犬灭活疫苗的灭活剂正式使用,现已被广泛应用于各种疫苗。
订货信息(现货)
货号        产品名称        描述        规格
168-21011        Beta-Propiolactone        β-丙内酯(β-PL,BPL)  5ml
166-21012        Beta-Propiolactone        β-丙内酯(β-PL,BPL)        25ml
        
分析指标
TEST                      SPECIFICATION
Appearance                  Colorless-nearly colorless,clear liquid
Density (20 deg. C)          1.146 - 1.153g/ml
Refractive index n20/D   1.410 - 1.415
Water                      (measured value)
Assay (capillary GC)          min. 95.0%
储存条件:           远离火源,密封,-20°C,避光,通风,干燥

参考文献:
1. Singh H.Laboratory techniques in rabies(Fourth edition)WHO Geneva,1996,234~2 40.
2. Montagnon B,et al.Laboratory techniques in rabies(Fourth edition)WHO Geneva,19 96,285~289
3. M.O.Schmita-Masse,Analyse de La β-propiolactone Par chromatogphie gaz- liquide I.REcherche d'un reside de β-propiolactone dans le Vaccin antirabique PasteurⅡ.Etude de la courbe d'hydrolyse de La β-propiolactone ápH7.4,Journa l of Chromatoyraphy,70(1972):128~134.

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 楼主| 发表于 2015-10-27 17:00:43 | 只看该作者
luoronghua发表于 2008-10-16 08:13 | :

问楼主两个问题。
1.  因为β-丙内酯作为灭活剂的浓度非常小(比如我用的是1:4000),需灭活的病毒原液较少,稀释的β-丙内酯大可能一次性用完,那么,稀释后的β-丙内酯怎么保存?-20°C水解情况怎么样?
2.  25ml的多少钱一瓶?
谢谢!

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 楼主| 发表于 2015-10-27 17:01:21 | 只看该作者
pipi302发表于 2009-8-18 12:28 :

To 楼上luoronghua
1. 尽量不要稀释用的,我也遇到过这种情况,咨询过相关人员,在-20℃水解倒不是很严重,但是在冻化过程中水解的还是比较大的,如果真是量比较少,尽量稀释完使用一次,冻存再用因水解浓度降低而造成参数的改变,一般的实验保证灭活完全还可以,但生产过程中就不允许了。
2. 价格找代理商咨询一下就可以了,反正感觉挺贵的!
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