禽流感病毒A／PFV／Restock／34（H7N1）HA基因在昆虫／杆状病毒系统中的表达
原帖地址： http://biosky.haotui.com/thread-653-1-14.html 原帖发布人：SF9cell《中国预防兽医学报》
Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine 起止页码：294-297 2006年 28卷 3期
摘 要:经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/PFV／Restock／1／34（H7N1）1．7kbHA基因的cDNA，将其克隆到pMD18-T中并测序。在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后，亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHis，筛选到重组质粒命名为pBlueBacHisH7HA，测序正确后与线性化的杆状病毒DNA（Bac-N-Blue^TMDNA）共转染sf9昆虫细胞，挑取蓝色蚀斑，经三轮蚀斑纯化，获得数株重组杆状病毒rpBlueHisH7HA。提取重组病毒DNA，经PCR证明目的基因片段已插入到杆状病毒基因组中，血凝实验、SDS-PAGE和Western blot实验结果表明HA基因在重组杆状病毒感染的HFive细胞中获得了表达。[
李贺 孟庆文 冉多良 于康震 陈化兰 李永强 吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001 新疆农业大学动物医学院,新疆乌鲁木齐830052
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